Hepatozoon sp. gamonts as an accidental finding in synovial liquid from an injured maned wolf (Chrysocyon brachyurus) in southeastern Brazil / Gamontes de Hepatozoon sp. como achado acidental em líquido sinovial de lobo guará (Chrysocyon brachyurus) no sudeste do Brasil

Abstract A free-living, adult male maned wolf (Chrysocyon brachyurus) was referred to the Governador "Laudo Natel" - FCAV/Unesp veterinary hospital after being found with skin lesions and a fracture on the right pelvic limb, which had to be amputated due to compromised integrity. Around 20 days later, bilateral accentuated swollen on humerus-radius-ulna articulation was observed. The synovial liquid was drained and sent to the laboratory for synovial cytology with Rosenfeld staining that revealed predominantly degenerated neutrophils with karyolytic chromatin associated with intracellular inclusions suggestive of Hepatozoon sp. gametocytes. Blood and synovial liquid samples were submitted to molecular analysis, aiming to amplify the Hepatozoon spp. 18S rRNA gene fragment. Despite the positioning of the found Hepatozoon sequence together with Hepatozoon canis previously detected in domestic carnivores, the BLAST analysis showed only 98% identity with H. canis. To the best of the authors' knowledge, this is the first time a Hepatozoon was detected in the synovial liquid by clinical pathology and molecular analyses.

Resumo Um lobo guará (Chrysocyon brachyurus) adulto, macho, de vida livre foi encaminhado para atendimento no hospital veterinário Governador "Laudo Natel" - FCAV/Unesp após ser encontrado com lesões de pele e fratura em membro pélvico direito, sendo amputado devido a comprometimento da integridade do membro. Aproximadamente 20 dias após a chegada ao hospital, foi notado acentuado aumento de volume bilateral em região de articulação úmero-rádio-ulnar. O líquido sinovial foi drenado e enviado para análise citológica com coloração de Rosenfeld, revelando a presença de neutrófilos degenerados com cromatina cariolítica associados a inclusões intracelulares sugestivas de gametócitos de Hepatozoon sp. Amostras de sangue e líquido sinovial foram submetidas a análises moleculares visando amplificar um fragmento do gene 18S rRNA de Hepatozoon spp. Apesar da sequência de Hepatozoon detectada se posicionar filogeneticamente no mesmo clado que H. canis previamente detectado em carnívoros domésticos, o resultado da análise do BLAST mostrou somente 98% de identidade com H. canis. De acordo com o conhecimento dos autores, esta é a primeira vez que Hepatozoon foi detectado no líquido sinovial por meio de patologia clínica e análises moleculares.

Relação do proteinograma sérico e as fases folicular e luteal do ciclo estral em éguas / Relation of the serum proteins and the follicular and luteal phasesof the estrous cycle in mares

O objetivo deste estudo foi obter o perfil eletroforético das proteínas séricas em éguas cíclicas e verificar as diferenças entre as fases folicular e luteal do ciclo estral nesta espécie. Foram utilizadas 18 éguas, totalizando 36 amostras de soro, sendo duas de cada égua. As amostras foram colhidas no estro e no diestro. As proteínas séricas totais foram obtidas pelo método do Biureto, a partir da utilização de Kits comerciais (LABTEST®) e, as diferentes subfrações proteicas, por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). O eletroforetograma das proteínas séricas colocou em evidência a presença de 17 a 25 frações proteicas, cujos pesos moleculares variaram de 22 a 254 kDa. Identificaram-se duas proteínas ainda não nomeadas oficialmente, de massas moleculares (MM) 23 kDa e 144 kDa. Os valores médios ± SEM obtidos para cada variável no estro e no diestro, respectivamente, foram: proteínas totais (g/dL) 7,11 ± 0,07 e 7,36 ± 0,07; albumina (mg/dL) 4790,83 ± 69,10 e 5027,19 ± 69,10; α1 glicoproteína ácida (mg/dL) 4,90 ± 0,31 e 4,93 ± 0,31; ceruloplasmina (mg/dL) 15,28 ± 1,31 e 10,65 ± 1,31; haptoglobina (mg/dL) 22,70 ± 1,16 e 27,06 ± 1,16; transferrina (mg/dL) 329,00 ± 9,78 e 350,16 ± 9,78; IgA (mg/dL) 119,91 ± 6,30 e 107,03 ± 6,30; IgG (mg/dL) 1525,07 ± 40,18 e 1517,25 ± 40,18; MM 23 (mg/dL) 204,44 ± 8,61 e 219,79 ± 8,61; MM 144 (mg/dL) 22,13 ± 0,55 e 21,49 ± 0,55. Não houve diferença significativa das proteínas totais e suas frações do estro para o diestro. Conclui-se que as modificações hormonais durante as fases do ciclo estral da égua não interferem no proteinograma sérico.

This study aimed to obtain the electrophoretic profile of serum proteins in cyclic mares and to verify the differences between the follicular and luteal phases of the estrous cycle in this species. Eighteen mares were used, totaling 36 serum samples, two of each mare. Samples were collected both in estrus and in diestrus. Total serum proteins were obtained by the Biureto method, by using commercial kits (LABTEST®), while the different protein subfractions by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The electroforetogram of serum proteins evidenced the presence of 17 to 25 protein fractions, whose molecular weights ranged from 22 to 254 kDa. Two proteins that were not yet officially named were identified, of molecular weights (MW) of 23 kDa and 144 kDa. The mean values (± SEM) obtained for each variable in estrus and diestrus were, respectively: total proteins (g/dL) 7.11 ± 0.07 and 7.36 ± 0.07; albumin (mg/dL) 4790.83 ± 69.10 and 5027.19 ± 69.10; α1 acid glycoprotein (mg/dL) 4.90 ± 0.31 and 4.93 ± 0.31; ceruloplasmine (mg/dL) 15.28 ± 1.31 and 10.65 ± 1.31; haptoglobine (mg/dL) 22.70 ± 1.16 and 27.06 ± 1.16; transferrin (mg/ dL) 329.00 ± 9.78 and 350.16 ± 9.78; IgA (mg/dL) 119.91 ± 6.30 and 107.03 ± 6.30; IgG (mg/dL) 1525.07 ± 40.18 and 1517.25 ± 40.18; MW 23 (mg/dL) 204.44 ± 8.61 and 219.79 ± 8.61; MW 144 (mg/dL) 22.13 ± 0.55 and 21.49 ± 0.55. No significant difference was verified in total proteins and its fractions in estrus and diestrus. The hormonal changes during the specific stages of the estrous cycle of the mare do not interfere with the serum proteinogram.

Relação do proteinograma sérico e as fases folicular e luteal do ciclo estral em éguas / Relation of the serum proteins and the follicular and luteal phases of the estrous cycle in mares

O objetivo deste estudo foi obter o perfil eletroforético das proteínas séricas em éguas cíclicas e verificar as diferenças entre as fases folicular e luteal do ciclo estral nesta espécie. Foram utilizadas 18 éguas, totalizando 36 amostras de soro, sendo duas de cada égua. As amostras foram colhidas no estro e no diestro. As proteínas séricas totais foram obtidas pelo método do Biureto, a partir da utilização de Kits comerciais (LABTEST) e, as diferentes subfrações proteicas, por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). O eletroforetograma das proteínas séricas colocou em evidência a presença de 17 a 25 frações proteicas, cujos pesos moleculares variaram de 22 a 254 kDa. Identificaram-se duas proteínas ainda não nomeadas oficialmente, de massas moleculares (MM) 23 kDa e 144 kDa. Os valores médios ± SEM obtidos para cada variável no estro e no diestro, respectivamente, foram: proteínas totais (g/dL) 7,11 ± 0,07 e 7,36 ± 0,07; albumina (mg/dL) 4790,83 ± 69,10 e 5027,19 ± 69,10; α1 glicoproteína ácida (mg/dL) 4,90 ± 0,31 e 4,93 ± 0,31; ceruloplasmina (mg/dL) 15,28 ± 1,31 e 10,65 ± 1,31; haptoglobina (mg/dL) 22,70 ± 1,16 e 27,06 ± 1,16; transferrina (mg/dL) 329,00 ± 9,78 e 350,16 ± 9,78; IgA (mg/dL) 119,91 ± 6,30 e 107,03 ± 6,30; IgG (mg/dL) 1525,07 ± 40,18 e 1517,25 ± 40,18; MM 23 (mg/dL) 204,44 ± 8,61 e 219,79 ± 8,61; MM 144 (mg/dL) 22,13 ± 0,55 e 21,49 ± 0,55. Não houve diferença significativa das proteínas totais e suas frações do estro para o diestro. Conclui-se que as modificações hormonais durante as fases do ciclo estral da égua não interferem no proteinograma sérico.

This study aimed to obtain the electrophoretic profile of serum proteins in cyclic mares and to verify the differences between the follicular and luteal phases of the estrous cycle in this species. Eighteen mares were used, totaling 36 serum samples, two of each mare. Samples were collected both in estrus and in diestrus. Total serum proteins were obtained by the Biureto method, by using commercial kits (LABTEST), while the different protein subfractions by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The electroforetogram of serum proteins evidenced the presence of 17 to 25 protein fractions, whose molecular weights ranged from 22 to 254 kDa. Two proteins that were not yet officially named were identified, of molecular weights (MW) of 23 kDa and 144 kDa. The mean values (± SEM) obtained for each variable in estrus and diestrus were, respectively: total proteins (g/dL) 7.11 ± 0.07 and 7.36 ± 0.07; albumin (mg/dL) 4790.83 ± 69.10 and 5027.19 ± 69.10; α1 acid glycoprotein (mg/dL) 4.90 ± 0.31 and 4.93 ± 0.31; ceruloplasmine (mg/dL) 15.28 ± 1.31 and 10.65 ± 1.31; haptoglobine (mg/dL) 22.70 ± 1.16 and 27.06 ± 1.16; transferrin (mg/dL) 329.00 ± 9.78 and 350.16 ± 9.78; IgA (mg/dL) 119.91 ± 6.30 and 107.03 ± 6.30; IgG (mg/dL) 1525.07 ± 40.18 and 1517.25 ± 40.18; MW 23 (mg/dL) 204.44 ± 8.61 and 219.79 ± 8.61; MW 144 (mg/dL) 22.13 ± 0.55 and 21.49 ± 0.55. No significant difference was verified in total proteins and its fractions in estrus and diestrus. The hormonal changes during the specific stages of the estrous cycle of the mare do not interfere with the serum proteinogram.

Comparison between two different experimental models of osteoarthritis in rabbits. Intra-articular collagenase injection and anterior cruciate ligament transection

ABSTRACT PURPOSE: To compare two different experimental models of osteoarthritis in rabbits: intra-articular collagenase injection and anterior cruciate ligament transection. METHODS: Ten adult rabbits were randomly divided in two groups: COLL (collagenase group) and ACLT (anterior cruciate ligament transection). The COLL group was treated with 0.5 ml collagenase solution (2mg collagenase/0.5 ml sterile PBS), and the ACTL group was subjected to anterior cruciate ligament. After six and twelve weeks, respectively, the animals in the COLL and ACTL groups were euthanized. The gross appearance and histological examinations conducted in the cartilage articular surface was blindly scored according to the criteria developed by Yoshimi et al. (1994) and Mankin et al. (1971), respectively. RESULTS: The gross morphologic observation, macroscopic score and histological examinations have demonstrated that the ACTL group presented the highest scores, and lesions more severe than those in the COLL group. CONCLUSIONS: Both methods, anterior cruciate ligament transection and collagenase, applied to the stifle joint of the rabbits have effectively induced degenerative changes in the cartilage tissue, through statistically significant analysis (p≤0.05). The ACTL method has presented more severe lesions.

Efeitos de diferentes doses de hiclato de doxiciclina nos parâmetros hematológicos de cães com erliquiose / Effects of different doses of doxycycline hyclate on haematological parameters of dogs with ehrlichiosis

Este estudo objetivou comparar os efeitos de duas doses de hiclato de doxiciclina sobre a contagem de hemácias, concentração de hemoglobina, hematócrito, contagem de leucócitos e plaquetas de cães com erliquiose. Foram estudados os grupos I, composto por cães saudáveis (n=6), negativos na sorologia para Ehrlichia canis e Leptospira spp., na PCR em tempo real para E. canis e Anaplasma platys e na semi–nested PCR para Babesia canis; grupos II (n=6) e III (n=6), compostos por cães com história clínica sugestiva, sorologia e/ou PCR em tempo real positivas para E. canis, e negativos na pesquisa de anticorpos anti-Leptospira spp., na PCR em tempo real para A. platys e na semi–nested PCR para B. canis. Os cães doentes foram tratados com hiclato de doxiciclina via oral a cada 12 horas por 30 dias (5 mg/kg, grupo II; 10 mg/kg, grupo III). Hemogramas foram feitos antes, decorridos 15 dias e aos 10 dias após o término dos tratamentos. Não houve diferenças entre os grupos nos tempos avaliados quanto às variáveis hemácias, hemoglobina, hematócrito e leucócitos. Observou-se diferença quanto aos trombócitos entre o grupo I e os grupos II e III (p<0,0001) no início do estudo. Aos 15 dias de tratamento, a média do grupo III foi menor que dos grupos I (p=0,008) e II (p=0,0007), indicando persistência da trombocitopenia, ausente no grupo II. Não houve diferença entre os grupos no tempo final, sugerindo que ambos os tratamentos promoveram aumento da contagem de plaquetas em cães naturalmente infectados por E. canis.

This study aimed to compare the effects of two doses of doxycycline hyclate on red blood cells, hemoglobin, hematocrit, white blood cells and platelets of dogs with ehrlichiosis. Group I, comprised of healthy dogs (n=6), negative on serology for Ehrlichia canis and Leptospira spp., real time PCR forE. canis and Anaplasma platys, and on semi–nested PCR for Babesia canis; Groups II (n=6) and III(n=6), comprised of dogs with suggestive clinical history, positive serology and/or real time PCR for E.canis, negative on research for anti-Leptospira spp. antibodies and real time PCR for A. platys, and on semi–nested PCR for B. canis were studied. Sick dogs were treated with doxycycline hyclate every 12hours, by mouth, for 30 days (5 mg/kg, group II; 10 mg/kg, group III). Complete blood counts were performed before, after 15 days, and 10 days after period of treatment was complete. No difference between groups at the studied time points were noticed for red blood cells, hemoglobin, haematocrit and white blood cells. Difference was observed for platelets between group I and groups II and III(p<0.0001) at the study on set. After 15 days of treatment, the mean platelet for group III was lower than groups I (p=0.008) and II (p=0.0007), indicative of persistent thrombocytopenia, already absentin group II. No difference between groups was noticed at final time point, which suggests that both treatments increased platelets in dogs naturally infected with E. canis.

Proteinograma do líquido sinovial de equinos hígidosobtido por eletroforese em gel de poliacrilamida / Proteinogram of synovial liquid from healthy equines determined by means of sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis

O objetivo do presente trabalho foi determinar o proteinograma do líquido sinovial de quarenta equinos hígidos. Após colheita, centrifugação e fracionamento das amostras, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida, contendo SDS-PAGE, e suas concentrações determinadas por densitometria computadorizada. Foram encontradas 16 a 26 proteínas no fracionamento eletroforético, compeso molecular variando de 16 a 238.000 Daltons (Da). Os pesos moleculares encontrados, correspondentes às proteínas mais conhecidas, foram albumina, 63.000Da; ceruloplasmina, 113.000Da; transferrina, 80.000Da; haptoglobina, 40.000Da; α-1-glicoproteínaácida, 37.000Da; IgA, 189.000Da e IgG, 74.000Da. O estabelecimento do proteinograma do líquido sinovial de equinos hígidos pode trazer contribuição significativa ao diagnóstico, tratamento e prognóstico de animais com alterações articulares.

The aim of this study was to determine the proteinogram of the proteins included in the synovial fluid of forty healthy horses. After collection, centrifugation and fractionation of the samples, the acute phase proteins were separated by electrophoresis in polyacrylamide gel containing SDS-PAGE, and their concentrations were determined by computerized densitometry. It was found 16 to 26 proteins on the electrophoretic fraction, with molecular weights from 16 to 238.000 Daltons (Da). The molecular weights found, corresponding to most known proteins were albumin, 63,000Da; ceruloplasmin, 113.000Da; transferrin, 80,000Da; haptoglobin, 40.000Da, α-1-acid glycoprotein, 37.000Da; IgA, IgG and 189.000Da, 74.000Da. The knowledge proteinogram of synovial fluid of healthy horses can bring significant contribution to the diagnosis, treatment and prognosis of animals with articular changes.

Proteinograma sérico e do líquido peritoneal de equinos hígidos e daqueles submetidos à obstrução intestinal experimental / Serum and peritoneal protein profile of healthy horses and horses subjected to experimental intestinal obstruction

Avaliou-se a resposta de fase aguda através da concentração das proteínas de fase aguda (PFA) no soro sanguíneo e no líquido peritoneal de vinte e um equinos, hígidos e submetidos à obstrução intestinal experimental, distribuídos em quatro grupos: obstrução de duodeno - GD (n=6), íleo - GI (n=6), cólon dorsal esquerdo - GM (n=6) e controle instrumentado - GC (n=3). Foram colhidas amostras de sangue e líquido peritoneal e, após centrifugação e fracionamento, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em SDS-PAGE. Identificaram-se as proteínas IgA, ceruloplasmina, transferrina, albumina, IgG, haptoglobina, α1-glicoproteína ácida e P24, no soro e no líquido peritoneal. Houve aumento nas concentrações sérica e peritoneal de todas as PFA, sendo mais evidente no líquido peritoneal e nos animais obstruídos. O fracionamento eletroforético das PFA no líquido peritoneal é mais eficaz no diagnóstico de processos inflamatórios abdominais, quando comparado ao sérico.

It was evaluated the acute phase response over the concentration of acute phase proteins (APP) in serum and in peritoneal fluid of twenty-one healthy equines submitted to experimental intestinal obstruction distributed in groups: duodenal obstruction (GD), ileum obstruction (GI), left-dorsal colon (GM), and instrumentalized control (GC). Blood and peritoneal liquid samples were collected, after centrifugation and fractioning and the acute phase proteins were separated by electrophoresis in SDS-PAGE. The acute phase proteins (APP) identified were IgA, ceruloplasmin, transferrin, albumin, IgG, haptoglobin, α1-acid glycoprotein and P24, in the serum and liquid peritoneal. There was anincrease in the serum and peritoneal proteins concentrations evidencing a higher response of the APP from the peritoneal fluid and of the obstructed groups. The electrophoretic separation of the proteins included in the peritoneal liquid is more effective when compared to the serum concentration in the diagnosis of abdominal inflammatory processes.

Comparative study between fibrin glue and platelet rich plasma in dogs skin grafts / Estudo comparativo entre a cola de fibrina e o plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos em cães

PURPOSE: Compare fibrin glue (Tissucol®) and platelet-rich plasma in full-thickness mesh skin grafts in dogs. METHODS: Eighteen dogs were used, divided into two groups: fibrin glue (FG) and platelet-rich plasma (PRP). In all the animals, a full-thickness 3x3 cm mesh skin graft was implanted. In the left limb, the biomaterial was place between the graft and the receptor bed, according to the group, while the right limb served as the control group. All the animals were evaluated clinically every 48 hours until the 14th day, using the variables of exudation, coloration, edema and cosmetic appearance. Three animals were evaluated histologically, on the third, seventh and tenth postoperative days, using the variables of fibroblasts, collagen, granulation tissue, microscopic integration-adherence and acute inflammation. RESULTS: Clinical evaluations showed that the group CF showed better scores for all variables compared to PRP group. On the histological evaluations PRP group had a higher presence of fibroblasts in the seventh and fourteenth days. CONCLUSION: The fibrin glue group was clinically superior to the platelet-rich group when used on full-thickness skin grafts in dogs.

OBJETIVO: Comparar a cola de fibrina (Tissucol®) e o plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos de espessura completa em malha em cães. MÉTODOS: Foram utilizados 18 cães, distribuídos em dois grupos, cola de fibrina (CF) e plasma rico em plaquetas (PRP). Em todos os animais foi realizado um enxerto cutâneo de 3x3 cm, em malha de espessura completa. No membro esquerdo foi colocado o biomaterial entre o enxerto e o leito receptor, cada qual em seu grupo, o membro direito serviu como grupo controle. Todos os animais foram avaliados clinicamente a cada 48 horas até o décimo quarto dia, através das variáveis: exsudação, coloração, edema e aspecto cosmético; histologicamente em três animais, no terceiro, sétimo e décimo quarto dia de pós-operatório através das variáveis: fibroblastos, colágeno, tecido de granulação, integração-aderência microscópica e inflamação aguda. RESULTADOS: Avaliações clínicas demonstraram que o grupo CF apresentou melhor escores em todas variáveis quando comparado com o grupo PRP. Nas avaliações histológicas o grupo PRP apresentou maior presença de fibroblastos ao sétimo e décimo quarto dia. CONCLUSÃO: A cola de fibrina foi clinicamente superior ao grupo plasma rico em plaquetas quando usados em enxertos cutâneos de espessura completa em cães.

Experimental Ehrlichia canis infection changes acute-phase proteins / A infecção experimental por Ehrlichia canis altera as proteínas de fase aguda

Early diagnosis of canine ehrlichiosis favors prompt institution of treatment and improves the prognosis for the animal, since this disease causes mortality among dogs. Studies have shown that determining the concentration of acute-phase proteins (APPs) may contribute towards early detection of disease and aid in predicting the prognosis. This study aimed to evaluate the APP profile in dogs experimentally infected with Ehrlichia canis, at the start of the infection and after treatment. It also investigated whether any correlation between APP levels and the clinical and laboratory alterations over the course of the disease would be possible. The results obtained showed abnormal levels of all the APPs on the third day after infection (D3), with the highest levels being reached on D18, with the exception of ceruloplasmin and acid glycoprotein, which presented their peaks on D6 and D12 respectively. We concluded that assessment of APP levels could contribute towards establishing an early diagnosis of canine ehrlichiosis, particularly regarding acid glycoprotein and ceruloplasmin, since these proteins were detected at increased levels even before the onset of clinical and laboratory findings of the disease.

O diagnóstico precoce da erliquiose canina favorece a pronta instituição do tratamento e melhora o prognóstico do animal, pois se trata de uma doença de alta mortalidade em cães. Estudos têm apontado que a determinação da concentração de proteínas de fase aguda (PFA) pode contribuir para detecção precoce de doenças e auxiliar na predição do prognóstico. O presente estudo objetivou avaliar o perfil de proteínas de fase aguda (PFA) em cães experimentalmente infectados com Ehrlichia canis, no início da infecção e após o tratamento. Além disso, se seria possível associá-las com as alterações clínico-laboratoriais durante o curso da doença. Os resultados obtidos evidenciaram que todas as PFA estudadas alteraram suas concentrações em D3 (dia 3), comparadas ao D0, atingindo concentrações máximas em D18, com exceção da ceruloplasmina e da glicoproteína ácida, cujos picos foram observados em D6 e D12, respectivamente. Concluímos que a avaliação das concentrações de PFA poderiam contribuir para o diagnóstico precoce da erliquiose canina, principalmente com relação à ceruloplasmina e glicoproteína ácida, pois seus aumentos foram anteriores ao aparecimento dos sinais clínicos e das alterações laboratoriais da doença.

Determinação sérica de haptoglobina, ceruloplasmina, α1-glicoproteína ácida, transferrina e α1-antitripsina, em equinos com cólica / Determination of serum haptoglobin, ceruloplasmin, α1-acid glycoprotein, transferrin and α1-antitrypsin in colic horses

Foram examinados 46 equinos adultos, 6 hígidos (G1) e 40 com cólica, submetidos à laparotomia. Vinte apresentavam lesões no intestino grosso (G2) e 20 no intestino delgado (G3). Avaliaram-se os teores séricos das proteínas de fase aguda: haptoglobina, ceruloplasmina, antitripsina, transferrina e glicoproteína ácida, antes e até sete dias após a laparotomia. Após centrifugação e fracionamento das amostras, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida contendo SDS-PAGE, e suas concentrações determinadas por densitometria computadorizada. Constatou-se elevação dos valores das proteínas de fase aguda nos animais com cólica, antes e após laparotomia, porém com valores mais elevados, precoces e persistentes nos animais do G3. Os resultados deveram-se ao processo inflamatório intestinal, desencadeado pela lesão entérica e indicam que o proteinograma sérico pode auxiliar na identificação do segmento intestinal obstruído e, consequentemente, na elaboração do prognóstico de equinos com cólica.

Forty six equines were examined, 6 were healthy (G1) and 40 with colic, submitted to laparotomy. Twenty were showing lesions on the large intestine (G2) and 20 lesions on the small intestine (G3). The serum concentrations of acute phase proteins: haptoglobin, ceruloplasmin, antitrypsin, transferrin, and - acid glycoprotein before and until 7 days after laparotomy. After centrifugation and fractioning of the samples, the acute phase proteins were individualized by electrophoresis on polyacrylamide gel containing SDS-PAGE, and the concentrations were determined by computerized densitometry. The increase was verified on the levels of acute phase proteins from animals with colic, before and after laparotomy, however with higher levels, premature and persistent on animals from G3. The results were due to the process of intestinal inflammation, caused by enteric injury and indicate that the serum protein profile can assist the identifying of the obstructed bowel segment and consequently the elaboration of the prognosis of horses with colic.

Anomalia de Pelger Huet em animais domésticos: uma revisão / Pelger Huet Anomaly in pet animals: a review

A anomalia de Pelger Huet (APH) é uma doença hereditária caracterizada pela não segmentação nuclear dos granulócitos, especialmente dos neutrófilos, devido a defeito genético no receptor da lamina-B (RLB) no cromossomo 1q41-43. Os neutrófilos apresentam núcleos bilobulados, ovais ou arredondados e citoplasma abundante, caracterizando assim um pseudo desvio à esquerda degenerativo. Neste trabalho revisional, objetivou-se caracterizar e descrever a anomalia em animais domésticos. A anomalia já foi descrita em cães, gatos, coelhos e equinos. Em todos os casos a APH mostrou-se como um achado hematológico ocasional, pois os pacientes foram levados à clínica veterinária devido a outras enfermidades e, após antibioticoterapia, descarte de doenças infecciosas e ausência de sinais clínicos; a persistência da hipossegmentação dos neutrófilos, durante meses, levou à conclusão de que se tratava de casos de APH. A hipossegmentação, nesses casos, foi confirmada pelo grau de segmentação do núcleo dos granulócitos. Apesar da falta de segmentação do núcleo, estudos demonstraram que não há alteração na função dos neutrófilos de cães com essa anomalia. A análise comparativa dos granulócitos de cães normais e com APH, através da microscopia eletrônica, coloração citoquímica e citometria de fluxo não evidenciaram diferenças significativas entre os dois grupos. Assim, a APH é considerada um achado ocasional e benigno do exame de sangue, cujas células devem ser diferenciadas morfologicamente de formas imaturas de neutrófilos presentes, principalmente, nos casos de enfermidades como doenças inflamatórias e leucemias.

Pelger Huet anomaly (PHA) is a hereditary disease characterized by non-segmentation of the granulocyte nuclei, especially neutrophils, due to a genetic defect in the lamin B-receptor (LBR) in chromosome 1q41-43. In that disorder, neutrophils present bilobulated, oval or round nuclei, and abundant cytoplasm, which characterizes a pseudo-degenerative left shift. The aim of this review was to characterize and describe PHA in pet animals. The anomaly has been described in dogs, cats, rabbits and horses, and all cases, it has shown itself as an occasional hematological finding, once animals were seen by the veterinarian because of other disorders. The persistence of neutrophils hyposegmentation for months after antibiotic treatment, ruling out infectious diseases, and absence of clinical signs led to PHA diagnosis. Hyposegmentation in those cases was confirmed by the degree of segmentation in granulocyte nuclei. However, despite the absence of nucleus segmentation, studies have shown that neutrophil function in PHA-affected dogs remains normal. The use of electron microscopy, cytochemical staining and flow cytometry did not show any significant differences between animals affected by PHA and animals considered normal. PHA is considered an incident and benign finding in blood test, whose cells should be morphologically differentiated from immature neutrophils, especially in cases of inflammatory diseases and leukemia.

Correlação da atividade de lactato desidrogenase e concentração de lactato com a classificação de efusões em cães / Correlation of lactate dehydrogenase and lactate concentration with dog's effusion classification

As efusões são problemas clínicos frequentes e que ocorrem em consequência de uma enfermidade que culmine com diminuição da pressão coloidosmótica intravascular, elevação da pressão hidrostática local, aumento da permeabilidade vascular e/ou comprometimento da drenagem realizada pelos vasos linfáticos. Dessa maneira, a avaliação laboratorial desse fluido torna-se relevante para que, em conjunto com os sinais clínicos apresentados pelo paciente, possa ser firmado um possível diagnóstico e instituída ação terapêutica adequada. Assim sendo, a classificação de uma efusão em transudato ou exsudato torna-se um dos pontos críticos para a elucidação do diagnóstico e condução do caso clínico. Em Medicina Veterinária, o método tradicional de classificação de uma efusão é baseado na contagem celular e na concentração de proteínas do fluido. Contudo, diversos estudos evidenciam que tais parâmetros não são suficientes para a correta classificação de todas as efusões. Assim, o presente estudo foi conduzido com o objetivo de verificar a correlação de outros parâmetros bioquímicos com a diferenciação das efusões transudativas e exsudativas e, para tal, foram avaliadas as atividades de lacatato desidrogenase (LDH) das efusões, a relação de sua atividade fluido/soro, concentração de lactato das efusões, o gradiente de concentração de lactato do soro para o fluido e a concentração de proteínas das efusões. Os resultados obtidos permitiram observar que a atividade de LDH, a relação LDH efusão/soro, a concentração de lactato e o gradiente de concentração de lactato soro/efusão apresentam diferença estatisticamente significativa (P<0,05), bem como alta correlação com a classificação de uma efusão exsudativa.

The effusions are frequent clinical problems and can occur in consequence to an illness that culminates with decrease of the intravascular coloidosmotic pressure, increase of local hydrostatic pressure, increase of vascular permeability and/or compromising of the drainage accomplished by lymphatic vases. Therefore, the laboratorial evaluation of this fluid becomes relevant, jointly with clinical signs presented by patient; to become possible the diagnosis definition and institution of appropriate therapeutic. Thus, classification of effusion in exudate and transudate is one of major points to elucidation of diagnosis and conduction of clinical case. In veterinary medicine the traditional method of an effusion classification is based on cellular counting and protein concentration of the fluid, however, several studies evidence that such parameters are not enough for the correct classification of all kinds of effusions. Considering this, the present study aimed to verify the correlation of some biochemical parameters with the differentiation of transudatives and exudatives effusions. To perform this, the activities of lactate dehydrogenase (LDH) were appraised, as well as the relationship of their activities with fluid/serum; lactate and proteins concentration and fluid/serum gradients of concentration of these same substances. The results allowed to observe that the activity of LDH, relationship LDH and fluid/serum, lactate concentration and lactate fluid/serum gradient of concentration present statistically significant difference (P<0.05), as well as a high correlation with the classification of an exudative effusion.

Linfoma canino: clínica, hematologia e tratamento com o protocolo de Madison-Wisconsin / Canine lymphoma: clinical and hematological aspects and treatment with the Madison-Wisconsin protocol

O linfoma é uma neoplasia de elevada incidência na população canina mundial, e que apresenta sinais clínicos diversos, dependentes da classificação anatômica e da extensão da doença. Este estudo objetivou avaliar as características clínicas e hematológicas de cães com linfoma no momento do diagnóstico, além da evolução clínica dos mesmos ao longo do tratamento com o protocolo de Madison-Wisconsin. Dos 18 cães inseridos no estudo, 50 por cento apresentaram a forma multicêntrica da doença e 33 por cento a forma cutânea. A manifestação clínica mais comum foi a linfadenomegalia superficial, acompanhada dos sinais sistêmicos de hiporexia, apatia e perda de peso. As principais alterações hematólogicas foram anemia normocítica normocrômica, trombocitopenia e leucocitose, associadas às síndromes paraneoplásicas. Vinte e sete por cento dos animais atingiram remissão completa da doença e apenas 22 por cento atingiram sobrevida de um ano. Houve correlação positiva entre o valor do hematócrito e o tempo de sobrevida para os cães que morreram, demonstrando a influência da anemia no prognóstico dos animais. Sugere-se que o estágio avançado da doença no momento do diagnóstico tenha influenciado as baixas taxas de remissão e sobrevida obtidas neste estudo.

Lymphoma is a neoplasm of high incidence in dogs, and has several clinical signs, depending on the tumor anatomical area and the extent of the disease. This study aimed to evaluate the clinical and hematological findings in dogs with lymphoma at diagnosis, and the clinical evolution during Madison-Wisconsin chemotherapy protocol. Of the 18 dogs that underwent the study, 50 percent of the dogs had the multicentric form and 33 percent the cutaneous forms of the disease. The most common clinical sign was superficial lymphadenomegaly, combined to systemic signs of hyporexia, apathy and weight loss. The main hematological changes were anemia, thrombocytopenia and leukocytosis, associated with paraneoplastic syndromes. Complete remission was achieved in 27 percent of the animals and the one-year survival rate was 22 percent. There was a positive correlation between the hematocrit and survival time in dogs that died, which indicates the importance of anemia in the prognosis. It is suggested that the advanced stage of the disease may have contributed to the low remission and survival rates observed in this study.

Quadro seroproteico como auxílio diagnóstico na anemia hemolítica imunomediada em cães / Serum proteic profile as diagnosis aids in immune-mediated hemolytic anemia in dogs

No presente protocolo experimental, determinaram-se os proteinogramas séricos, por intermédio da eletroforese em gel de poliacrilamida contendo duodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE), de 120 cães com raças e idades variadas e atendidos junto ao Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" da FCAV/Unesp, com o objetivo principal de comparar diferentes frações seroproteicas em estados anêmicos regenerativos, arregenerativos, imunomediados primários e secundários. Os referidos animais foram distribuídos em cinco grupos experimentais: grupo 1: 20 cães de controle; grupo 2: 28 cães com anemia regenerativa não imune; grupo 3: 27 cães com anemia arregenerativa não imune; grupo 4: 10 cães com anemia hemolítica imunomediada primária; grupo 5: 35 cães com anemia hemolítica imunomediada secundária. A técnica SDS-PAGE permitiu o fracionamento de 24 proteínas, cujos pesos moleculares (PM) variaram de 18.000 a 165.000 daltons (Da). Os cães com AHIM primária e secundária apresentaram 24 frações proteicas em seus traçados eletroforéticos, enquanto que cães de controle (1) e portadores de anemia regenerativa (2) e arregenerativa (3) de natureza não imune apresentaram 23 frações de proteínas, cuja proteína de peso molecular 68.000Da não foi encontrada. Dessa forma, 23 frações proteicas foram detectadas e revelaram-se comuns aos proteinogramas dos cães de controle e daqueles dos quatro grupos experimentais. Destas, identificaram-se nominalmente 11 frações proteicas, e as demais foram estudadas com base nos seus respectivos pesos moleculares. Em relação aos cães de controle, os anêmicos (grupos 2, 3, 4 e 5) apresentaram maiores concentrações de transferrina sérica e entre estes os animais portadores da AHIM primária. Todos os cães anêmicos apresentaram teores séricos de haptoglobina e fosforilase significativamente maiores que os controles, enquanto que a concentração sérica de ceruloplasmina foi significativamente maior nestes. Tais achados analisados em...

This assay aimed to determine the serum protein - via polyacrylamide gel electrophoresis, which contained duodecil sodium sulfate (SDS-PAGE) - in 120 dogs, with different breeds and ages, seen by the Veterinary Hospital "Governor Laudo Natel." These animals were grouped into five experimental groups: Group 1 - group control with 20 dogs, group 2 - 28 dogs with regenerative anemia; group 3 - 27 dogs with arregenarative; anemia group 4 - 10 dogs with primary immune-mediated hemolytic anemia (AHIM 1.rd); group 5 - 35 dogs with secondary immune-mediated hemolytic anemia (AHIM 2.rd). The technique allowed the SDS-PAGE fractionation of 24 protein, whose molecular weights (PM) ranged from 18,000 to 165,000 daltons (Da). The dogs with 1st and 2nd AHIM showed 24 protein fractions in their tracks electrophoretic, while other groups of dogs showed 23 fractions of protein, whose molecular protein weight of 68,000Da was not found. Thus, twenty-three proteins were common to proteinograms of the five experimental groups. From these, it was possible to identify eleven protein fractions nominally, and others were identified by their molecular weights. For control dogs, the anemic (groups 2, 3, 4 and 5) showed higher concentrations of serum transferrin and between them, the animals carrying the primary IMHA. All groups of dogs showed anemic levels of serum haptoglobin and phosphorylase significantly higher than the control dogs, while the serum ceruloplasmin was lower in anemic dogs. These findings provide additional information to the elucidation of the AHIMs in dogs.

Quantificação de células CD34+ do sangue do cordão umbilical de cães / Quantification of CD34+ hematopoietic stem cells from the umbilical cord of dogs

As células-tronco promovem a reconstituição hematopoética e de outros tecidos, estando presentes no embrião, no sangue periférico, na medula óssea e no sangue do cordão umbilical (SCU). Os modelos experimentais de células-tronco do sangue periférico e da medula óssea em cães têm propiciado informações relevantes para transplantes de células-tronco em humanos. Entretanto, não existe estudo sobre as células-tronco no SCU canino no Brasil. O objetivo deste ensaio foi quantificar as células nucleadas e as células-tronco CD34+ no SCU de cães para propostas de reconstituição hematológica. No presente protocolo experimental, a coleta de SCU de 40 cães neonatos foi realizada para contagem das células nucleadas no contador automático de células sangüíneas e contagem das células-tronco CD34+ no citômetro de fluxo. O método de coleta do SCU na porção justaplacentária dos vasos umbilicais permitiu a quantificação das células-tronco CD34+. Os valores das células nucleadas do SCU foram reduzidos em relação àqueles do sangue periférico de cães sadios recém-nascidos e adultos. Apesar do volume escasso de SCU (1325µL), a quantidade de células-tronco do cordão umbilical canino (3,38±2,72 CD34+ x10(6) kg-1) é semelhante àquela reportada para medula óssea, bem como para o sangue periférico mobilizado de cães adultos, sendo coincidente com aquela preconizada para reconstituição hematopoética.

Stem cells promote the reconstitution of the hematopoietic and other tissues, and are present in the embryo, peripheral blood, bone marrow and umbilical cord blood (UCB). The experimental models of bone marrow and peripheral blood stem cells in dogs provide important information for stem cells transplants in humans. However, there are no studies on the UCB cells of dogs in Brazil. This experiment aimed at quantifying nucleated and stem cells in the umbilical cord of dogs having as its purpose the hematological recuperation. In this assay, UCB of 40 neonates dogs was collected for nucleated cell count in automatic cell counter and stem cell CD34+ count in flow cytometer. The method of UCB collection at the juxta-placental portion of the umbilical vessels allowed UCB blood and stem cell CD34+ quantification. The nucleated cell values of UCB were reduced as compared to the reference values of the peripheral blood of healthy neonate and adult dogs. Despite the small volume of UCB (1325µL), the quantity of stem cells in the canine umbilical cord (3.38±2.72 CD34+ x10(6) kg-1) is similar to that reported in the bone marrow and mobilized peripheral blood of adult dogs, coinciding with the amount recommend for hematopoetic reconstitution.

Autologous bone marrow transplantation in a dog with lymphoma: a clinical study / Transplante autólogo de medula óssea em um cão com linfoma: ensaio clínico

The objective of this study is to provide the first report of bone marrow transplantation (BMT) in dogs in Brazil. A Rottweiler with cutaneous lymphoma was submitted to a twelve-week Madison-Wisconsin chemotherapy protocol followed by autologous bone marrow transplantation. For this, 10mL kg-1 of bone marrow was collected simultaneously from both iliac crests and cryopreserved in a freezer at -80°C. The conditioning step was performed by administering cyclophosphamide by intravenous route at 400mg m-2. Bone marrow was reinfused after defrosting in a water bath at 37°C. Bone marrow nucleated cell counts before and after freezing, showed a small relative loss of nucleated cells (35.10 and 31.80x10³µL-1 , respectively). Cyclophosphamide induced neutropenia which was reverted by a granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) capable of stimulating hematopoetic reconstitution. On the day 360 after transplant the patient was found to be in complete remission. This study indicates that autologous BMT in a dog with lymphoma submitted to myelosuppressive chemotherapy was potentially safe and effective.

Este estudo teve como objetivo descrever o primeiro relato de transplante de medula óssea (TMO) em cães no Brasil. Para tanto, um rottweiller com linfoma cutâneo foi submetido ao protocolo quimioterápico de Madison-Wisconsin pelo período de 12 semanas, seguido pelo transplante autólogo de medula óssea. Para tanto, 10mL kg-1 de medula óssea foram coletados de ambas as cristas ilíacas do paciente, simultaneamente; sendo o volume final criopreservado em freezer a -80°C. A etapa de condicionamento foi realizada com a administração da ciclofosfamida, por via intravenosa, na dose de 400mg m-2. A reinfusão da medula óssea foi realizada após o descongelamento da bolsa em banho-maria a 37°C. As contagens de células nucleadas de alíquotas obtidas da bolsa de medula óssea antes do congelamento e após o descongelamento demonstram pequena perda relativa de células nucleadas (35,10 e 31,80 x10³µL-1, respectivamente). A neutropenia decorrente da ciclofosfamida foi revertida com a administração de um fator estimulador de colônia de granulócitos (G-CSF), que foi capaz de acelerar a reconstituição hematopoética. O paciente encontra-se no dia + 360 pós-transplante em remissão completa da doença. Este trabalho indicou que o TMO autólogo em um cão com linfoma, submetido à quimioterapia mielossupressora, foi potencialmente seguro e efetivo.

Hemogasometria de eqüinos submetidos à obstrução experimental do duodeno, íleo e cólon maior / Blood gas analysis of horses submitted to experimental obstruction of duodenum, ileum and large colon

Visando estudar os parâmetros do equilíbrio ácido-base de eqüinos submetidos a um modelo experimental de obstrução intestinal, 24 animais foram distribuídos em quatro grupos, controle instrumentado (GI), obstrução do duodeno (GII), íleo (GIII) e cólon maior (GIV). As amostras de sangue venoso foram coletadas antes das cirurgias (T0), durante as obstruções (T30ob-T180ob) e após as desobstruções (T60des-T180des). Os eqüinos do GIV, no T30ob, e os eqüinos do GII, nos T60ob, T90ob e T120ob, apresentaram aumento do pH(v), da cHCO-3(vP) e da cBase(v) que, acrescidos do aumento da pCO2(v) e da ctCO2(v), caracterizou a alcalose metabólica com compensação respiratória. Nos T90ob e T120ob, nos animais do GII, e no T180ob, nos animais do GIII, a pO2(v) e a sO2(v) tiveram comportamento semelhante. Os valores baixos apresentados pelos animais do GII foram associados à hipercapnia ou à hipoventilação, desencadeadas para a correção da alcalose metabólica. Entretanto, a hipoxemia apresentada pelos animais do GIII foi associada à hipovolemia presente neste período. As alterações ácido-base observadas constituem-se de alterações leves e temporárias, as quais não são capazes de predizer o diagnóstico das obstruções intestinais específicas em eqüinos com cólica. Entretanto, por relacionarem-se diretamente com a precocidade do distúrbio gastrintestinal, elas auxiliam o pesquisador no prognóstico.

This study aimed to evaluate parameters of acid-base balance in horses submitted to an experimental model of intestinal obstruction. Twenty-four animals were divided in four groups: instrumented control (GI), duodenum obstruction (GII), ileum obstruction (GIII) and large colon obstruction (GIV). Venous blood samples were collected before surgery (T0), during the obstruction (T30ob-T180ob) and after unblocking procedures (T60des-T180des). Animals from GIV, at T30ob and animals from GII, at T60ob, T90ob and T120ob, presented higher values for pH(v), cHCO-3(vP) and cBase(v) which, added to the increase of pCO2(v) and ctCO2(v), characterized the metabolic alkalosis with respiratory compensation. At T90ob and T120ob, in GII animals, and at T180ob, in GIII animals the pO2(v) and sO2(v) had similar response. Low values presented by GII animals were associated to hypercapnia or hypoventilation triggered for metabolic alkalosis correction. However, a hypoxemia presented by GIII animals was associated to hypovolemia at that period. There were light and temporary acid-base alterations that are not capable to predict specific intestinal obstruction diagnosis in equines with colic. However they help in prognosis since both have a direct relation with the precociousness of gastrointestinal disturbance.

Equilíbrio ácido-base e hidroeletrolítico em eqüinos com cólica / Acid-base and hidroelectrolytic balance in colic horses

Foram utilizados setenta eqüinos distribuídos em três grupos experimentais, G1 (vinte eqüinos hígidos), G2 (vinte e cinco eqüinos com cólica, os quais passaram por tratamento clínico ou cirúrgico e sobreviveram) e G3 (vinte e cinco eqüinos com cólica, os quais passaram por tratamento clínico ou cirúrgico e foram a óbito ou foram sacrificados). Amostras de sangue foram obtidas em dez diferentes momentos, mediante punção da jugular, para estudo do equilíbrio ácido-base e hidroeletrolítico. Os eqüinos com cólica apresentaram diminuição (P<0,05) nos valores do pH(v), principalmente os animais do G3, a qual, associada com a diminuição da pCO2(v), cBase(v) e cHCO-3(vP), confirmou a acidose metabólica, que teve como origem a produção aumentada de lactato durante a glicólise anaeróbica decorrente da hipovolemia. Adicionalmente apresentaram hiponatremia, hipocalemia e hipercloremia. A presença e a magnitude dos desequilíbrios contribuíram substancialmente com o prognóstico dos animais com cólica.

Seventy horses were distributed into three experimental groups ad follows: G1, twenty healthy animals; G2, twenty-five colic horses that survived after clinical or surgical treatment; and G3, twenty-five colic horses that were sacrificed or died after clinical or surgical treatment. Blood samples were taken from the jugular vein to assess acid-base balance and water-electrolyte balance. Colic horses had lower pH(v) (P<0.05), mainly G3 animals. Acidosis was confirmed by the lower pH(v) associated with decreased pCO2(v), cBase(v) and cHCO-3(vP), which was probably due to an increased production of lactate during anaerobic glycolysis as a result from hypovolemia. Furthermore, hyponatremia, hypokalemia and hyperchloremia were detected. The presence and the extent of the imbalances contributed substantially to the prognosis of colic horses.

Quantificação de subpopulações linfocitárias no sangue do cordão umbilical de eqüinos / Quantification of lymphocyte subpopulations in equine umbilical cord blood

Este estudo visou a determinar os valores eritroleucométricos e quantificar as subpopulações linfocitárias no sangue do cordão umbilical (SCU) e no sangue jugular de eqüinos neonatos. Foi realizada a colheita de SCU e do sangue jugular de 20 potros ao nascimento. As amostras foram submetidas às determinações dos valores eritroleucométricos e à quantificação de subpopulações de linfócitos-T, pela técnica citofluorométrica. Não foram verificadas diferenças significativas (P<0,05) entre os valores médios de tais parâmetros, entre o sangue jugular de neonatos e o SCU eqüino. O valor total para neutrófilos segmentados, no SCU e na jugular dos neonatos, foi inferior ao reportado para eqüinos ao nascimento. As contagens de linfócitos CD5+ e CD4+ no SCU e jugular de neonatos eqüinos foram inferiores àquelas admitidas para o sangue periférico de eqüinos adultos, indicando um componente imunológico imaturo. No entanto, a contagem de linfócitos CD8+ foi semelhante à descrita em sangue periférico de eqüinos adultos. A proporção CD4:CD8 obtida nesse ensaio, tanto para o SCU (2,64±0,91), como no sangue jugular de eqüinos neonatos (2,41±0,81), demonstrou uma dominância das células T CD4+ sobre os linfócitos T CD8+.

The objective of the present study was to determine erythometric and leukometic values and quantify subpopulations of lymphocytes in umbilical cord blood (UCB) and jugular blood of neonate foals. UCB and jugular blood were collected from 20 foals at birth and processed for determination of erythometric and leukometric values and quantification of subpopulations of T lymphocytes by cytofluorometry. No significant difference (P<0.05) was noted between average values in neonate jugular blood and equine UCB. Total values observed for segmented neutrophils in UCB and neonate jugular blood were lower than those reported for horses at birth. The quantity of CD5+ and CD4+ lymphocytes was lower in UCB and neonate jugular blood than in peripheral blood of adult horses, which indicates immunological immaturity. The frequency of CD8+ lymphocytes, however, was similar to that described for peripheral blood of adult horses. CD4:CD8 ratio observed in the present study both for UCB (2.64±0.91) and for neonate jugular blood (2.41±0.81) demonstrated the predominance of CD4+ T lymphocytes over CD8+ T cells.

Physical-chemical analysis of the cerebrospinal fluid of healthy dogs submitted to different storage periods and temperatures / Análise físico-química do líquido cerebroespinal de cães hígidos em diferentes períodos e temperaturas de estocagem

Disorders involving the nervous system have a great importance in veterinary medicine because they have a high incidence and few auxiliary tools for their diagnostic, prognostic and evaluation of the employed therapy. Today, the diagnostic is based, mainly, on the patient history and neurologic examination. Hence, evaluation of the cerebrospinal fluid elements is one of the few alternatives to clinically access the central nervous system (CNS). Even with the great usefullness of the physical-chemical and cytoscopy exams of the CSF in veterinary neurology, there are few studies concerning the stability of its elements under freezing storage. The present study was aimed at verifing the influence of temperature and period of conservation on physical-chemical characteristics of the CSF of healthy dogs. For that purpose, CSF samples were collected by puncture of the cisterna magna of dogs clinically healthy, and then were analysed for density, pH, glucorrhachia, total proteins and activity of the enzymes creatine kinase (CK) and aspartate aminotransferase (AST), after storage in different temperatures (25°C, 4°C and -4°C) and periods (immediately after collection and after 24 hours, 48 hours, a week and a month). Regarding the obtained results it was possible to verify that the parameters studied were stable up to a month of storage, under freezing at -4°C.

Disfunções envolvendo o sistema nervoso são de grande importância na Medicina Veterinária, pois tratam-se de enfermidades de elevada incidência e com poucos subsídios auxiliares no seu diagnóstico, prognóstico e na avaliação de terapias empregadas. Ainda hoje, o diagnóstico baseia-se, em grande parte, no histórico e no exame clínico neurológico. Dessa forma, a análise dos constituintes do fluido cefalorraquidiano torna-se uma das poucas alternativas de acesso clínico ao sistema nervoso central (SNC). Mesmo com a grande utilidade do exame físico-químico e citoscópico do liquor na neurologia veterinária, poucos são os estudos sobre a estabilidade dos seus constituintes sob estocagem. Dessa forma, o presente trabalho teve como finalidade verificar a influência da temperatura e do tempo de conservação nas características físico-químicas do liquor de cães hígidos. Para tanto, foram coletadas amostras de LCR, através da punção da cisterna cerebelo-medular de cães clinicamente sadios, as quais foram submetidas à análise da densidade específica, do pH, da glicorraquia, das proteínas totais e das atividades das enzimas creatina quinase (CK) e aspartato aminotransferase (AST), após conservá-las em diferentes temperaturas (25°C, 4°C e -4°C) e por diferentes períodos de tempo (logo após a colheita, 24 horas, 48 horas, uma semana e um mês). Dentre os resultados obtidos, foi possível verificar, principalmente, que houve estabilidade dos parâmetros estudados por até um mês de estocagem nas amostras mantidas sob a temperaturas de congelamento de -4°C.